Evaluation of Cattle for Naturally Colonized Shiga Toxin-Producing Escherichia coli Requires Combinatorial Strategies
Table 2
Assay results per animal.
Animal number
Number of mauve, fluorescent colonies shown as CFU/ml1
Latex agglutination−based serogroup of non−O157 isolates
Colony lysate PCR
Fecal−DNA PCR
Vero cell assay
O103
O111
O121
O145
O26
O45
eae
stx
stx1
stx2
hlyA
O103
O111
O121
O145
O26
O45
eae
Stx
stx1
stx2
hlyA
CPE dilution3
CPE scores
No CPE4 with anti-Stx1 sera
No CPE with anti-Stx2 sera
5602
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
−
+
+
8
1
n
y
5620
7 × 103
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
64
3
y
y
5657
5 × 104
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
8
1
y
y
NT2
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
5724
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
0
3
y
y
5743
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
16
1
n
y
5759
1 × 103
NT
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
2
2
y
y
5760
1 × 108
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
4
1
n
y
5771
4 × 104
NT
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
y
y
5776
5 × 104
NT
−
−
−
−
−
−
+
+
+
−
+
+
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
4
1
y
y
5787
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
4
1
y
n
5800
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
8
1
y
y
5825
4 × 104
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
+
+
−
+
+
4
1
n
y
5845
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
+
−
+
+
2
2
n
y
5868
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
4
2
y
y
5874
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
8
1
y
y
5875
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
y
y
5889
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
4
1
y
y
5901
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
8
1
y
y
5915
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
+
−
+
+
0
0
n/a
n/a
5916
4 × 104
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
4
2
y
y
5922
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
2
3
y
y
5935
2.4 × 104
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
0
3
y
y
O26
−
−
−
−
+
−
+
−
−
−
+
5938
6.5 × 106
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
y
y
5939
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
2
y
y
5949
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
8
1
y
y
5950
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
+
+
+
8
3
y
n
5964
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
8
3
n
y
5966
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
8
1
y
y
5982
3.5 × 108
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
+
+
−
+
+
0
2
n
y
5985
3 × 108
NT
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
8
1
y
y
5996
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
4
1
y
y
6009
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
4
3
y
n
6011
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
8
1
y
y
6012
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
y
y
6013
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
0
2
y
y
6017
2 × 107
O103
+
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
y
y
6044
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
n
n
6049
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
0
3
y
y
6069
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
n
n
6082
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
2
3
y
n
6089
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
4
y
n
6101
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
3
y
n
6120
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
y
y
6122
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
2
2
y
y
6130
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
3
y
y
6137
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
−
4
2
y
y
6141
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
2
2
n
y
6148
2 × 105
NT
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
3
n
n
6150
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
2
n
y
6153
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
−
0
1
n
y
6171
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
−
+
+
+
0
3
y
y
6177
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
4
3
y
y
6179
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
−
4
3
y
y
6507
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
8
1
n
y
6509
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
2
4
y
y
6529
5 × 104
O26
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
+
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
4
3
n
y
O121
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
6542
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
2
1
y
y
6561
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
2
1
n
y
6582
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
+
−
−
−
−
−
+
+
+
+
+
0
3
y
y
1Putative non-O157 STEC forming mauve, fluorescent colonies on CHROMagar STECTM, and postenrichment in EC broth were further analyzed by serology and colony PCR. 2NT, not typed to either of the “Big 6” non-O157 STEC serogroups by latex agglutination. 3The last dilution at which CPE still observed on the Vero cells was selected when setting up the toxin neutralization assays. 4y, yes; n, no; n/a, not applicable as no CPE was observed when at undiluted concentrations.